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免疫熒光三標(biāo)(芯片)
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  • 價(jià)格¥1500
  • 單位
  • 貨號HKF2022
  • 品牌浩克

產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品參數(shù)
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【產(chǎn)品信息】

產(chǎn)品名稱產(chǎn)品貨號規(guī)格價(jià)格
免疫熒光三標(biāo)(芯片)HKF20221500元

服務(wù)介紹:

組織芯片免疫熒光染色,是將許多不同處理的組織以規(guī)則的微陣列方式排列于同一載體上,同時進(jìn)行相同指標(biāo)的免疫熒光檢測。

一、實(shí)驗(yàn)器材及試劑

  1. 實(shí)驗(yàn)器材
名稱廠家型號
脫水機(jī)湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JT-12S
生物組織自動包埋機(jī)湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JB-L5
轉(zhuǎn)輪式切片機(jī)徠卡顯微系統(tǒng)上海有限公司HistoCoreBIOCUT
石蠟包埋機(jī)(冷臺)湖北貝諾醫(yī)療科技有限公司JB-L5
KD-P組織攤片機(jī)浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司51A011
烤箱天津市萊玻特瑞儀器設(shè)備有限公司GFL125
載玻片及蓋玻片江蘇匯達(dá)醫(yī)療器械有限公司710510    
微波爐美的M1-L213B
脫色搖床上海琪特分析儀器有限公司STS-3
渦旋儀秒生科技有限公司SI-A256
移液槍DragonKE003068
組化筆Gene techGT1001
熒光顯微鏡NIKONECLIPSE C1
  • 主要實(shí)驗(yàn)試劑
試劑廠家貨號
無水乙醇杭州宏達(dá)化工儀器有限公司SJ003614
二甲苯國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司10023418
20x檸檬酸抗原修復(fù)液(PH6.0)杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0003
PBS緩沖液杭州浩克生物技術(shù)有限公司 
BSA杭州浩克生物技術(shù)有限公司HK5021
一抗:xxxx紅+xxxx綠  
二抗:HRP超敏山羊抗兔鼠通用二抗杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0029
Flare520杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0014
Flare570杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0015
DAPI(即用型)杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0005
抗熒光淬滅封片劑杭州浩克生物技術(shù)有限公司HKI0007-1
  • 石蠟切片免疫熒光實(shí)驗(yàn)步驟
  • 石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min-無水乙醇Ⅰ6min -95%酒精6min-85%酒精6min蒸餾水洗。
  • 抗原修復(fù):組織切片置于盛滿檸檬酸抗原修復(fù)液(PH6.0)的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù),中火8min?;?min中低火7min,此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā),切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。
  • 阻斷內(nèi)源性過氧化物酶:切片加上3%的雙氧水,室溫孵育25min,將玻片置PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。
  • 血清封閉:在組化圈內(nèi)滴加3%BSA 均勻覆蓋組織,室溫封閉30min。
  • 加一抗:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走),在圈內(nèi)滴加按一定比例稀的抗體覆蓋組織。切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。
  • 加二抗:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗覆蓋組織,避光室溫孵育50min。
  • 信號放大:將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min 。滴加相對應(yīng)顏色Flare信號放大試劑,3-5min.將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min 。雙標(biāo)或者多標(biāo)的實(shí)驗(yàn)從這一步結(jié)束后重復(fù)步驟2-7,標(biāo)記第二個、或者第三個抗體,最后在進(jìn)入步驟8即可。

8、DAPI復(fù)染細(xì)胞核:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加DAPI染液,避光室溫孵育10min。

9、封片:玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動洗滌3次,每次5min。切片稍甩干后用抗熒光淬滅封片劑封片。

10、鏡檢拍照:切片于尼康倒置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。

Flare染料激發(fā)波長發(fā)射波長
DAPI 藍(lán)色350420
Flare480青綠450480
Flare520綠490520
Flare570紅550570
Flare620橙590620
Flare690粉630690

暫無

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